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二氧化碳培养箱的应用及维护
点击次数:1237 发布时间:2014-07-26 返回

二氧化碳培养箱的应用及维护

     说到二氧化碳培养箱大家可能对它的名字比较熟知,但对它的真正了解可能不是太多,前面我们也提到过它的两种常见的工作形式,今天我们主要说说它的应用范围及一些维护技巧。

      二氧化碳培养箱主要是通过在培养箱箱体内模拟形成一个类似细胞/组织在生物体内的生长环境,如稳定的温度(37°C)、稳定的CO2水平(5%)、恒定的酸碱度(pH值:7.2-7.4)、较高的相对饱和湿度(95%),来对细胞/组织进行体外培养的一种装置。因为它这样独有的特性使它广泛应用于细胞、组织培养和某些特殊微生物的培养,常见于细胞动力学研究、哺乳动物细胞分泌物的收集、各种物理、化学因素的致癌或毒理效应、抗原的研究和生产、培养杂交瘤细胞生产抗体、体外授精(IVF)、干细胞、组织工程、药物筛选等研究领域。其原理是应用人工的方法在培养箱内造成微生物和细胞、细菌、病毒生长繁殖的人工环境,如控制一定的温度、湿度、气体等,主要用于组织培养和一些特殊微生物的培养。

    正因为它是培养细胞和细菌的专用设备,那么对于细胞来说,非常理想的培养环境同样也适合这些污染物的生存,培养箱本身是不会辨别的,而细胞培养中大部分时间里细胞都是位于培养箱内。

     如病毒:由于病毒寄生生存,爆发后尽快和正常细胞隔离,丢弃处理,相对来说容易处理,对操作者威胁较大;尽管病毒污染的细胞不影响原代培养,但生产疫苗是不安全的。因此,潜在病毒是细胞大量生产和疫苗、干扰素等生物制品制作中的难题。

     支原体:支原体污染后,因为它们不会使细胞死亡可以与细胞长期共存,培养基一般不发生浑浊,细胞无明显变化,外观上给人以正常感觉,实则细胞已经受到多方面潜在影响,如引起细胞变形,影响DNA合成,抑制细胞生长等,往往被大多数实验者忽视。

     细菌:细菌污染后,培养基1-2天就会变色,对细胞生长影响明显,应迅速将污染细胞与其它细胞系隔离,灭菌后丢弃,还要用实验室消毒剂消毒培养器皿和超净台。

      真菌(霉菌和酵母菌):真菌生长的比较慢,不象细菌那么容易被发现,但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了;目前没有好的抑制方法,包括现在常用的两性霉素,一旦污染容易反复爆发,尤其孢子很难杀灭。

      所以对于二氧化碳培养箱而言,其培养细胞的本身对细胞、细菌的污染防治也是尤为重要的,否则我们的实验将会产生适得其反的效果。

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